HRZZ 2019

HRZZ Projekt: IP-2019-04-1958

 

Otkrivanje organizacije i funkcije kolesterolove domene u plasma membrani fibroznih stanica leće oka uz primjenu fluorescentnih metoda


Opis projekta:

Očna mrena je glavni uzrok sljepoće u svijetu. Operacija je trenutno jedini učinkovit tretman. Razlog za pojavu očne mrene je nepoznat, ali veliki broj dokaza ukazuje na to da prisutnost kolesterola i domena dvosloja kolesterola (DDKa) u očnoj leći pomaže u održavanju njene transparentnosti. Membrane očne leće igraju važnu ulogu u održavanju transparentnosti. Imaju jedinstven lipidni sastav i strukturu koja spriječava stvaranje očne mrene. U ovom istraživanju ćemo se usredotočiti na ulogu lipidnog dijela dvosloja membrane fibroznih stanica u održavanju homeostaze fibroznih stanica i leće. Prisutnost DDKa osigurava zasićenost okolnog fosfolipidnog dvosloja kolesterolom. Ove osobine održavaju glavna fizikalna svojstva lipidnih membrana leća konzistentnima i neovisnim o promjenama u fosfolipidnom sastavu. Dakle, DDKa pomažu u održavanju homeostaze membrane leće dok se membranski fosfolipidni sastav značajno mijenja sa starenjem. U ovom projektnom prijedlogu, prilagodit ćemo postojeće metode za pripremu modelnih membrana s visokim sadržajem kolesterola (odgovarajući modeli membrane fibroznih stanica) i primijeniti ih na ispitivanje membrana fibroznih stanica primjenjujući fluorescentne metode. Temeljem ovih istraživanja istražit ćemo promjene membrana fibroznih stanica koje se javljaju sa starenjem i pojavom mrene. Posebnu pažnju ćemo posvetiti određivanju glavnih razlika u organizaciji lipida u membranama leća osoba s mrenom i onih s prozirnim lećama iste starosti. U ovim studijama će se primjenjivati fluorescentna mikroskopija i metoda oslikavanja i praćenja pojedinačnih fluorescentnih molekula. Naš je cilj razjasniti kako se plazma membrane fibroznih stanica leće, a posebno njen lipidni dvosloj, mijenjaju tijekom starenja i stvaranja mrene, tako da se alternativne strategije za sprječavanje, usporavanje, napredovanje i liječenja mogu predložiti i razviti. Očekuje se da će ove studije dati vrijedan uvid u ulogu plazma membrane fibroznih stanica u održavanju transparentnosti leća. Nastojimo razumjeti razlike u membranama fibroznih stanica leće koje doprinose stvaranju mrene.
 

- voditelj projekta	Marija	Raguž	marija.raguz@mefst.hr	Sveučilište u Splitu, Medicinski fakultet
- suradnik 1	Witold	Subczynski	subczyn@mcw.edu	Medical College of Wisconsin
- suradnik 2	Zvonimir	Boban	zvonimir.boban@mefst.hr	Sveučilište u Splitu, Medicinski fakultet
- suradnik 3	Akihiro	Kusumi	kusumiaki@gmail.com	Okinawa Institute of Scence and Technology
- suradnik 4	Ana	Vučinović	ana_vucinovic@yahoo.com	Klinički bolnički centar Split
- suradnik 5	Josipa	Marin Lovrić	josipa.marin@gmail.com	Klinički bolnički centar Split
- suradnik 6	Ljubo	Znaor	ljuboznaor@gmail.com	Klinički bolnički centar Split

 

Objavljeni istraživački i pregledni članci

 

1. Mardešić, I., Boban, Z., & Raguz, M. (2024). Electroformation of Giant Unilamellar Vesicles from Damp Films in Conditions Involving High Cholesterol Contents, Charged Lipids, and Saline Solutions. Membranes, 14(10), 215. https://doi.org/10.3390/membranes14100215
2. Mardešić, I., Boban, Z., & Raguz, M. (2024). Electroformation of Giant Unilamellar Vesicles from Damp Lipid Films with a Focus on Vesicles with High Cholesterol Content. Membranes, 14(4), 79. https://doi.org/10.3390/membranes14040079
3. Boban, Z., Mardešić, I., Jozić, S. P., Šumanovac, J., Subczynski, W. K., & Raguz, M. (2023). Electroformation of Giant Unilamellar Vesicles from Damp Lipid Films Formed by Vesicle Fusion. Membranes, 13(3), 352. https://doi.org/10.3390/membranes13030352
4. Mardešić, I., Boban, Z., Subczynski, W. K., & Raguz, M. (2023). Membrane Models and Experiments Suitable for Studies of the Cholesterol Bilayer Domains. Membranes, 13(3), 320. https://doi.org/10.3390/membranes13030320
5. Mainali, L., Raguz, M., & Subczynski, W. K. (2023). Quantification of Age-Related Changes in the Lateral Organization of the Lipid Portion of the Intact Membranes Isolated from the Left and Right Eye Lenses of the Same Human Donor. Membranes, 13(2), 189. https://doi.org/10.3390/membranes13020189
6. Subczynski, W. K., Raguz, M., & Widomska, J. (2022). Multilamellar Liposomes as a Model for Biological Membranes: Saturation Recovery EPR Spin-Labeling Studies. Membranes, 12(7), 657. https://doi.org/10.3390/membranes12070657
7. Boban, Z., Mardešić, I., Subczynski, W. K., Jozić, D., & Raguz, M. (2022). Optimization of Giant Unilamellar Vesicle Electroformation for Phosphatidylcholine/Sphingomyelin/Cholesterol Ternary Mixtures. Membranes, 12(5), 525. https://doi.org/10.3390/membranes12050525
8. Boban, Z., Mardešić, I., Subczynski, W. K., & Raguz, M. (2021). Giant Unilamellar Vesicle Electroformation: What to Use, What to Avoid, and How to Quantify the Results. Membranes, 11(11), 860. https://doi.org/10.3390/membranes11110860
9. Boban, Z., Puljas, A., Kovač, D., Subczynski, W. K., & Raguz, M. (2020). Effect of Electrical Parameters and Cholesterol Concentration on Giant Unilamellar Vesicles Electroformation. Cell biochemistry and biophysics, 78(2), 157-164. https://doi.org/10.1007/s12013-020-00910-9

Ispiši stranicu